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              酶活檢測試劑盒基于高度水溶性的四唑鹽進行測定

              發布時間: 2022-05-30  點擊次數: 46次
                酶活檢測試劑盒測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1mL玻璃比色皿(光徑10mm)、研缽/勻漿器、可調式移液器、臺式離心機、恒溫水?。囵B箱和蒸餾水。
               
                基于高度水溶性的四唑鹽進行測定。WST-8在電子介體的作用下可還原生成水溶性甲瓚產物,產生顏色反應。WST-8被細胞中的脫氫酶還原而生成橙色產物(甲瓚),可溶于組織培養基中。細胞中脫氫酶產生的甲瓚產物的量與活細胞的數量成正比。CCK-8法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
               
                細胞活性是判斷體外培養細胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標,如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養條件變化等。細胞活性檢測方法有很多種,如臺盼藍染色法、克?。洌┬纬煞?、、ATP含量測定法、熒光染色法、比色法(MTT法)等。
               
                一些熒光染料對死細胞和活細胞有不同的作用效果,利用熒光顯微鏡檢測細胞活性。如碘化丙錠(PI),被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡細胞的細胞膜,因此活細胞不被染料染上色,只有死細胞或是凋亡細胞才能染上紅色。
               
                吖啶橙(AO)能透過質膜完整的細胞,嵌入細胞DNA,使之發出明亮的綠色熒光。溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞,嵌入DNA,發橘紅色光。也可應用AO-EB雙染法鑒定細胞活性。這種檢測方法相比傳統的染料,具有靈敏度高,操作簡便,結果容易分辨等特點,而且利用雙染法還可以分辨活細胞、凋亡早期細胞、凋亡晚期細胞、死亡細胞。在細胞凋亡的檢測上有很廣泛的應用。
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